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组织样本如何保存?

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请问下生物组织样本取样后如何保存防止RNA降解?是可以直接干冰保存,还是必须用保存试剂?RNAlater与Trizol有什么不同?

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admin  管理员  发表于 2023-5-20 13:36:36 | 显示全部楼层
实验室的经验就是组织样本采集后,迅速放入进口冻存管中,拧紧后立即放入液氮,再转移到-80℃中保存。细胞样本经 Trizol 或 Lysis/Binding Solution 处理后储存于-80℃冰箱中。在-20℃冰箱中储存不宜太久。细胞样品需要用PBS洗掉培养基之后再进行保存操作;细菌液体培养基需离心取得菌体沉淀之后进行保存操作。对于液氮保存样本,务必注意不要用 Eppendorf 管和国产冻存管,因为这些管子从液氮中取出时极易发生管子爆裂,造成样本损失或实验人员损伤;同时应随时注意液氮罐中液氮量,需保证充足,切记液氮挥发完全。

admin  管理员  发表于 2023-5-20 13:38:43 | 显示全部楼层
网上找的资料,供参考:

RNAlater是一种液态的、无毒的组织保存试剂。它能迅速稳定组织,保护非冷冻细胞RNA于原位。RNAlater只能用于保存新鲜组织,在浸入RNAlater之前不能冷冻组织。简单切碎组织样本,至少一边的最大厚度不能大于0.5cm,然后将组织碎块迅速放入到5倍体积的RNAlater中,4℃放置过夜后,转入-20℃保存,如需转入-80℃冰箱,请在4℃放置过夜后,从RNAlater中取出样本保存于-80℃冰箱。不要将全血、血浆或血清中的 RNA 保存在 RNAlater 中,因为它们蛋白含量过高,与 RNAlater  混合后易形成不溶的沉淀。

TRIzol是从细胞和组织中提取total RNA的即用型试剂,其主要成分是苯酚。为了完全抑制RNA酶活性,TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯基乙醇等来抑制内源和外源RNase(RNA酶)。TRIzol保存细胞时,只需要用TRIzol将细胞裂解完全(澄清、透明、无细胞团块),液氮速冻保存即可。保存组织样本时,必须先将组织研磨成粉末或匀浆完全后再保存于TRIzol中,并液氮速冻,严禁直接将组织块放入TRIzol中。为保证后期total RNA抽提效果,请使用进口的TRIzol试剂。
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