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mRNA ployA尾序列如何鉴定?

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大家都知道ployA序列的长度和准确度对mRNA的稳定性非常重要,有什么办法能够很好的测序质控嘛?

评论 1

admin  管理员  发表于 2023-5-27 14:28:57 | 显示全部楼层
目前主要通过质谱或测序的方法来对polyA尾来进行质控。质谱的方法是先通过酶将polyA切下来后打质谱,分析polyA的出现的长度就行。测序方法可以分为两种,一种是利用Sanger测序,这个测序需要优化测序试剂及反应条件,目前只有少数公司能做,好像Thermo也推出了试剂盒。另外一种是利用PacBio测序来做,不需要将polyA单独切下来做,可以直接得到全长序列,由于建库过程中涉及到逆转录及PCR过程,会带来一些假阳性序列结果,整体测序表现与质谱相当甚至更好点,有不少文章已经介绍了相关的方法,可以自行查看下。
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