细胞实验是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下，在无菌、适温和丰富的营养条件下，使其生长繁殖，并维持其结构和功能，进而完善相关实验的过程。存在证据等级低的劣势，但由于其来源容易获取、有细胞特异性及实验周期短、成本低等特点，被广泛应用于实验中。需要无菌无毒细胞培养环境、恒定的细胞生长温度(37°C)、合适的气体环境(溶氧和二氧化碳)、适宜的pH及合适的细胞培养基和血清。
购买药物前需明确药物的剂型（冻干粉、溶液等）、分子量、溶解度、所需溶剂以及规格。
药物配制
1. 固体药物
配制公式：药物质量(mg) = 要达到的浓度 (mM) × 溶剂体积 (L) × 药物的分子量（需注意药物溶解的最小浓度及最高浓度）
浓度快速转换原则：
1）mM转换mg/mL：摩尔浓度数值乘以分子量再除以1000。
2）mg/mL转换mM：质量浓度数值除以分子量再乘以1000。
2. 液体药物
配置公式：起始浓度 X 起始体积 = 最终浓度 X 最终体积
药物溶剂
1. 纯ddH2O：适用于水溶性药物。
2. 万能溶剂DMSO：适用于不溶于水的药物。
3. 其他：如四氢呋喃、丙酮、乙酸乙酯等等。
切记：溶解药物之前查看说明书，有些药物需特殊的试剂溶解。
设置合适的给药浓度
查看文献明确给药浓度。查阅方式为：药物名称+细胞系名称；如果不存在相关文献，建议查询其他细胞系是否存在；然后设置剂量梯度进行预实验（两次预实验：第一次浓度范围宽（可配置两个母液）、第二次依据第一次结果缩窄但不能过窄）。
每个药物浓度梯度设置为6-10孔（包含0浓度在内）；一般为等比数列（2、3、5、10等）。
以2为例：0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6……
设置好浓度梯度，将原始母液配制不同浓度的药物。
向培养板内加入不同浓度药物
1. 如果为悬浮细胞先离心、如为贴壁细胞可直接吸走旧的培养基，注意不要吸到细胞。
2. 贴壁细胞需用PBS溶液进行清洗，盖板后呈八字晃动，吸走PBS（注意吸干净防止残留）；悬浮细胞可省略。
3. 纯空白组无细胞、只加入培养基；对照组有细胞、加培养基不加药；剩余8孔按照实验设计加入不同浓度的药物及培养基（建议每个药物浓度加6孔）。
4. 把细胞放回培养箱。
不要急，慢慢来，实验最需要的就是静心和耐心。
文章来源： 微信公众号 神内小蜗
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